纤连蛋白包被实验方案

开始前注意事项

1. 确保细胞健康且数量充足。
2. 保持无菌状态的情况下，溶液形式提供的纤连蛋白产品在2-8°C可至少储存一年。
3. 以冻干粉形式提供的纤连蛋白产品须采用适宜的溶剂复溶。须在37°C下至少溶解30分钟。可能会有少量不溶物残留。这不会影响产品性能。复溶的纤连蛋白溶液可等分为工作体积，在-20°C或更低的温度下储存。
4. 应避免涡旋或剧烈搅动纤连蛋白溶液。
5. 在封闭的无菌容器或无菌封口袋中，纤连蛋白包被的培养器皿可以在2-8 °C储存2-4周。
6. 表面覆盖浓度可能因培养细胞而异。建议进行实验方案优化以确定细胞的实际包被浓度。推荐浓度请见表1。
7. 包被后请勿过度干燥培养板/盖玻片，否则会影响细胞附着。
8. 上述实验方案步骤均须在无菌条件下执行。

培养器皿的纤连蛋白包被实验方案

1. 将纤连蛋白稀释至所需浓度。最佳附着条件取决于细胞类型和应用。常用包被浓度为1–5 μg/cm²。
2. 请尽量减少培养表面包被量。
3. 在覆盖了整个区域后，吸走多余的溶液。这些溶液可用于包被另一个孔或板。
4. 引入细胞和培养基之前，至少室温风干45分钟。

纤连蛋白水解片段

可以使用蛋白水解酶从血浆纤连蛋白中得到纤连蛋白片段。这些片段是绘制纤连蛋白分子区域的有用工具，而这些分子负责特异结合胶原和其他生物学相关的功能。

常见问题解答 (FAQ)

1.纤连蛋白产品的纯度是多少？

我们无法确定纤连蛋白溶液的纯度。运行SDS PAGE凝胶，取一条120kDa的主纤连蛋白条带与以往批次进行比较，确保质量一致。我们所有的纤连蛋白干粉纯度均≥95％。

2.稀释纤连蛋白的最佳溶剂是什么？

表1中提供了可用的纤连蛋白稀释溶剂。

3.纤连蛋白可以储存多长时间？

在无菌条件下，以溶液形式提供的纤连蛋白产品可2-8°C储存一年。稀释后的未用纤连蛋白可2-8°C储存1周。密封良好、避免纤连蛋白污染和/或风干的情况下，纤连蛋白包被板最多可2-8°C储存4周。如果包被材料表面变色或出现裂纹，请勿使用产品。

4.纤连蛋白包被的最佳浓度是多少？

表1列出了我们的纤连蛋白包被浓度。但建议适当优化，以适应特定细胞浓度。

5.研究干细胞分化的最佳ECM蛋白是什么？

虽然层粘连蛋白和纤连蛋白都是广泛使用的ECM蛋白，但应通过测试实验来确定您细胞所需的类型。干细胞在分化的不同阶段会在表面表达多种不同的整合素。ECM蛋白的选择应取决于您需要研究的分化阶段。