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Sigma-Aldrich

KOD热启动DNA聚合酶

High fidelity DNA polymerase designed for accurate PCR amplification of long strand and GC- rich DNA templates for cloning and cDNA amplification applications.

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别名:
High fidelity PCR, Hot start PCR, Hot start polymerase, KOD hot start polymerase

重组

expressed in E. coli

质量水平

100
200

用途

sufficient for 1000 reactions
 sufficient for 200 reactions

特点

Difficult Templates/Specialty Enzymes PCR
High Fidelity PCR
dNTPs included
hotstart

制造商/商品名称

Novagen®

储存条件

OK to freeze

技术

PCR: suitable

输入

purified DNA

运输

dry ice

储存温度

−20°C

相关类别

一般描述

PCR涉及通过热稳定的DNA聚合酶对DNA模板进行复制。所用聚合酶的加工性、特异性和保真度会影响PCR反应的效率、可重复性和产率。高保真PCR使用具有低错误率的DNA聚合酶，并在复制目的DNA方面具有很高的准确性。当需要精确地扩增基因靶标时，例如在直接测序或克隆下游蛋白质表达时，保真度至关重要。不必要的突变可能会严重影响您的研究。我们的分析表明，KOD酶是一种获得快速、准确和高产PCR的简便选择。EMD Millipore′的分子生物学家致力于开发和配制在PCR扩增过程中具有最高特异性、保真度和产率的聚合酶。此外，优化的缓冲液组成、便捷的预混液和循环参数提供了额外的易用性和数据重现性。KOD Hot Start DNA聚合酶*是一种由KOD DNA聚合酶与两种抑制DNA聚合酶和在室温下3′→5′核酸外切酶的活性的单克隆抗体组成的预混合（Mizuguchi 1999）。KOD Hot Start可扩增高达21 kb的基因组DNA模板，包括用于PCR应用的富含GC的基因。KOD Hot Start将KOD的高保真度、快速延伸速度和出色的加工性与抗体介导的热启动的高特异性结合在一起。减少了非特异性扩增，因此可避免在设置和初始温度升高期间可能发生错误启动事件。另外，在室温设置期间由于核酸外切酶活性引起的引物降解也得到了有效地抑制。KOD Hot Start DNA聚合酶可产生平末端PCR产物，适用于使用Novagen Perfectly Blunt® 和LIC载体试剂盒进行克隆。

来源：重组Thermococcus kodakaraensis KOD1 DNA聚合酶，大肠杆菌表达
浓度：1.0 U/l
切割活性：未检出
扩增效率：可实行PCR反应；已经验证21°C下活性受到抑制
存储: -20°C

*Toyobo制造，EMD分销。未在日本市场销售。

注意：购买本产品包括豁免根据产品说明书中所规定的专利提起的诉讼，仅可将所购买的量用于购买者自己的内部研究。其他专利权（例如5¢核酸酶工艺的专利权）不得明示、暗示或禁止反言。有关购买许可的更多信息，可联系Director of Licensing, Applied Biosystems, 850 Lincoln Centre Drive, Foster City, California 94404, USA获取。

应用

使用KOD热启动DNA聚合酶：
  • 高保真扩增基因组DNA以进行桑格测序。
  • 进行基因组DNA扩增，以筛选用于靶向外显子纯合性缺失的单细胞克隆。
  • 从小鼠淋巴瘤细胞分离的基因组DNA上扩增特定基因家族。

特点和优势

  • 高保真度：与传统Taq DNA聚合酶相比，保真度高出大约80倍
  • 长片断&PCR：扩增基因组DNA高达12 kbp，质粒DNA和λ DNA模板高达21 kbp，错误率低
  • 高效扩大富含GC的区域
  • 抗体介导热启动功能可降低引导错误和引物二聚体的形成
  • 产生适合克隆的平端PCR产物
  • 环境温度设置方便，与自动化兼容
  • 兼容定点诱变实验方案
  • 最佳KOD热启动缓冲液，广泛靶标上实现PCR性能

组分

•200 U 或 5 × 200 UKOD Hot Start DNA聚合酶（1.0 U/µl）

•1.2 ml 或 5 × 1.2 ml用于KOD Hot Start DNA聚合酶的10X PCR缓冲液

•1 ml 或 5 × 1 ml25 mM MgSO₄

•1 ml 或 5 × 1 mldNTP 混合物（各2 mM）

警告

毒性：标准处理（A）

单位定义

在含有20 mM Tris-HCl（pH 7.5，25°C）、8 mM氯化镁₂、7.5 mM DTT、50 µg/ml BSA、分别150 µM dATP、dCTP、dGTP、dTTP（未标记形式和[3H] dTTP的混合物）、以及150 µg/ml活化的小牛胸腺DNA的反应中，一个单位定义为在75°C、30分钟内可催化10 nmol dNTP掺入酸不溶形式所需要的酶量。

其他说明

Mizuguchi, H., et al. 1999.J. Biochem.(Tokyo)126, 762.Kitabayashi, M., et al. 2002.Biosci.Biotechnol.Biochem.66 (10), 2194.Fujii, S., et al. 1999.J. Mol.Biol.289, 835.

法律信息

由Toyobo制造并由EMD分销。购买本产品包括豁免根据产品说明书中所规定的专利提起的诉讼，仅可将所购买的量用于购买者自己的内部研究。′其他专利权（例如5′核酸酶工艺的专利权）不得明示、暗示或禁止反言。有关购买许可的更多信息，可联系Director of Licensing, Applied Biosystems, 850 Lincoln Centre Drive, Foster City, California 94404, USA获取。
NOVAGEN is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
Perfectly Blunt is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

象形图

Exclamation mark
GHS07

警示用语：

Warning

危险声明

H319

危险分类

Eye Irrit. 2

储存分类代码

10 - Combustible liquids

WGK

WGK 2

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