Merck
CN

LRHSRMKB

Roche

KAPA LongRange

HotStart ReadyMix, suitable for PCR, with dye

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别名:
PCR
NACRES:
NA.55

质量水平

用途

sufficient for 100 reactions
sufficient for 500 reactions

保质期

≤18 mo.

特点

Long Range PCR
dNTPs included
hotstart

包装

kit of 1.25 mL (100 x 25 μL rxn; KK3601)
kit of 6.25 mL (500 x 25 μL rxn; KK3602)

制造商/商品名称

Roche

技术

PCR: suitable

输入

purified DNA

储存温度

−20°C

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一般描述

带染料长片段PCR系统的KAPA HotStart® ReadyMix是Taq DNA聚合酶和具有校对能力的工程古细菌(B家族)DNA聚合酶的混合物。该双酶系统专门设计用于支持长片段和/或灵敏PCR,保真度比Taq聚合酶高3-4倍。在热启动配方中,KAPA长片段与专有的抗体结合,在第一个变性步骤前使酶失去活性,从而消除假扩增产物并提高反应效率和灵敏度。

带染料长片段的KAPA HotStart ReadyMix也以2X ReadyMix格式提供,上样染料包含PCR所需的全部成分(引物和模板除外)。反应缓冲液中的上样染料可以让你直接上样PCR产物到琼脂糖凝胶上,无需额外的步骤。

应用

带有染料的KAPA LongRange HotStart® ReadyMix已用于:
  • 长靶标和/或低量扩增
  • 标准短程和中程聚合酶链反应(PCR)
  • T-A 克隆
  • 用于新一代 DNA 测序的靶向样品富集
  • 全基因组扩增

生化/生理作用

KAPA Taq HotStart® DNA聚合酶和改良古细菌(B型)DNA聚合酶均具有5'→3'聚合酶活性,但只有KAPA Taq HotStart DNA聚合酶具有5'→3'核酸外切酶活性,只有B型DNA聚合酶具有3′→5′核酸外切酶(校对)活性。KAPA 长片段热启动的保真度比Taq DNA 聚合酶的保真度高2-4倍,但低于纯校对聚合酶(如KAPA HiFi)的保真度。用KAPA LongRange HotStart的反应产物带聚A尾,可克隆至TA克隆载体。

特点和优势

扩增高灵敏度的长靶点:
  • 扩增灵敏度高,特异性可达 15kb 的靶点
  • 低输入 DNA 的高产率

优于复杂靶点:

  • 在竞争远程系统失效时表现出高产量、更高的灵敏度和特异性

临时速记:
  • KAPA LongRange HotStart是KAPA Taq HotStart和校正DNA聚合酶的混合物。
  • 适用于短、中、长距离 PCR,以及模板 DNA 量较低的 PCR。
  • 保真度比Taq高2-4倍。
  • 对于短扩增子,可替换Taq DNA聚合酶以提高产量和/或保真度。
  • 以高产量和高灵敏度扩增中长靶片段。
  • 带有染料的2X ReadyMix含有两种惰性跟踪染料,可将PCR产物直接加载到琼脂糖凝胶上进行分析。

质量

每批次KAPA LongRange HotStart DNA聚合酶均已确认含有<2%的污染蛋白(Agilent蛋白质230分析)。2X KAPA LongRange HotStart ReadyMix经过严格的质量控制测试,不具有污染核酸外切酶和核酸内切酶的活性,并且满足有关DNA污染水平的严格要求。

制备说明

在每次使用前,应确保产品已完全解冻并充分混合。短期使用时,可将试剂保存4℃条件下(最长1个月)。长期储存时,放回-20℃中。

其他说明

仅供研究使用。不用于诊断操作。

法律信息

HOTSTART is a registered trademark of Molecular BioProducts, Inc.
ReadyMix is a trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC

仅试剂盒组分

产品编号
说明

  • KAPA Long Range DNA Polymerase or KAPA Long Range HotStart® DNA Polymerase 5 U/μL or 2.5 U/μL

  • 1X KAPA Long Range Buffer

  • dNTP Mix 0.3mM of each dNTP at 1X

  • 2X KAPA LongRange HotStart® ReadyMix with dye

  • MgCl2 at 1X 2 mM

储存分类代码

12 - Non Combustible Liquids

WGK

WGK 1

闪点(°F)

does not flash

闪点(°C)

does not flash

法规信息

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SNP genotyping using TaqMan technology: the CYP2D6* 17 assay conundrum.
Gaedigk A, et al.
Scientific Reports, 5, 9257-9257 (2015)
Alltalents T Murahwa et al.
Papillomavirus research (Amsterdam, Netherlands), 7, 102-111 (2019-03-08)
Six novel human papillomaviruses from penile swabs were characterised. Multiple full genome clones for each novel type were generated, and complete genome sizes were: HPV211 (7253bp), HPV212 (7208bp), HPV213 (7096bp), HPV214 (7357), HPV215 (7186bp) and HPV216 (7233bp). Phylogenetically the novel
High-resolution melt analysis to detect sequence variations in highly homologous gene regions: application to CYP2B6.
Twist G P, et al.
Pharmacogenomics, 14(8), 913-922 (2013)

商品

An overview of directed evolution and the methods for generating proteins with optimized or entirely new functions.

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默克成为罗氏旗下KAPA Biosystems产品的独家供应商,在美国、巴西和日本以外的所有国家提供聚合酶链反应(PCR)和实时定量聚合酶链反应(qPCR)所用的全新酶及试剂盒产品。

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