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Merck
CN

C1639

胶原酶 来源于溶组织梭菌

0.2 μm filtered, for general use, Type I-S, 0.2-1.0 FALGPA units/mg solid, ≥125 CDU/mg solid

别名:

梭菌肽酶 A

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关于此项目

化学文摘社编号:
UNSPSC Code:
12352204
NACRES:
NA.54
EC Number:
232-582-9
MDL number:
Specific activity:
≥125 CDU/mg solid, 0.2-1.0 FALGPA units/mg solid
技术服务
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Quality Level

sterility

0.2 μm filtered

form

lyophilized powder

specific activity

≥125 CDU/mg solid, 0.2-1.0 FALGPA units/mg solid

mol wt

68-130 kDa

storage temp.

−20°C

Application

该产品适用于人类肿瘤,小鼠肾脏,人类成人和胎儿的脑、肺和许多其他上皮组织的解聚。 它还被证明适用于肝脏和肾脏灌注研究、胰腺消化、非实质性大鼠肝细胞的分离、以及肝细胞制备。 胶原酶也已用于制备动脉组织,以对晚期糖基化终产物进行研究。 该酶用于(浓度约为1mg/ml)对肝细胞的释放进行检测。 消化浓度范围为0.1至5mg/mL。

Biochem/physiol Actions

每摩尔胶原蛋白酶被4g原子钙活化。 它被乙二醇-双(β-氨基乙基醚)-N,NN′,N′-四乙酸,β-巯基乙醇、谷胱甘肽、巯基乙酸和8-羟基喹啉抑制。
胶原酶产物是 C. histolyticum分泌的酶混合物,可通过分泌酶中10-18个组分的相对比率来区分不同的产物。 其主要成分是两种胶原酶、梭菌蛋白酶、和一种中性蛋白酶。 这些酶的协同作用可降解胶原蛋白和其他细胞内物质。胶原酶和中性蛋白酶的作用对于从组织中有效释放细胞是必需的。 各种类型的胶原蛋白都是胶原酶的天然底物。

Preparation Note

从I型(C0130)制备得到。可以通过在37℃下将0.05-0.1mg/mL胶原酶溶解在含有0.36mM氯化钙(TESCA,pH7.4)的50mM TES缓冲液中,以制备储备溶液。

Other Notes

一个胶原蛋白消化单元(CDU)从牛跟腱胶原蛋白中释放的肽链量和1.0 μ亮氨酸,5小时,pH7.4,37℃,在钙离子存在下的茚三酮颜色相同。一个 FALGPA水解单元每分钟,25℃,水解1.0 μmole 呋喃基丙烯酰-Leu-Gly-Pro-Ala。一个中性蛋白酶单元水解酪蛋白,产生颜色和1.0 μmole 酪氨酸每5小时,pH7.5,37℃下产生的相同。一个梭菌蛋白酶单元在DTT存在下,pH7.6,25℃,每分钟水解1.0 μmole BAEE。

Disclaimer

以原包装形式,该产品在-20°C下可稳定保存一年。在37℃、50℃和-20℃下30天内,FALGPA或蛋白酶活性没有损失。如果分液(10mg/mL)形式快速冷冻并且在-20℃下冷冻保存,粗胶原酶的溶液可保持稳定。进一步的冻融步骤会破坏溶液稳定性。 当在冰上保持时,该产品可在7小时内保持100%活性。


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pictograms

Health hazardExclamation mark

signalword

Danger

Hazard Classifications

Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3

target_organs

Respiratory system

存储类别

11 - Combustible Solids

wgk

WGK 1

flash_point_f

Not applicable

flash_point_c

Not applicable

ppe

dust mask type N95 (US), Eyeshields, Faceshields, Gloves

法规信息

常规特殊物品

此项目有



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实验方案

在测定胶原酶活性时,使用N-(3-[2-呋喃基]丙烯酰基)-Leu-Gly-Pro-Ala在345nm处进行连续分光光度法测定。胶原酶水解胶原肽键。

To measure collagenase activity, N-(3-[2-Furyl]acryloyl)-Leu-Gly-Pro-Ala is used in a continuous spectrophotometric rate determination at 345 nm. Collagenase hydrolyzes collagen peptide bonds.