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C2799

胶原酶 来源于溶组织梭菌

powder, suitable for cell culture, ≥4 FALGPA units/mg solid, high purity, ≥700 CDU/mg solid (CDU = collagen digestion units)

别名:

梭菌肽酶 A

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关于此项目

化学文摘社编号:
9001-12-1
UNSPSC Code:
12352204
NACRES:
NA.75
EC Number:
232-582-9
MDL number:
MFCD00130830
EC 号:
3.4.24.3 (BRENDA, IUBMB)
Specific activity:
≥4 FALGPA units/mg solid, ≥700 CDU/mg solid (CDU = collagen digestion units)
Biological source:
Clostridium histolyticum
技术服务
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biological source

Clostridium histolyticum

Quality Level

200

form

powder

specific activity

≥4 FALGPA units/mg solid, ≥700 CDU/mg solid (CDU = collagen digestion units)

mol wt

68-130 kDa

purified by

chromatography

technique(s)

cell culture | mammalian: suitable

pH

7.4

foreign activity

neutral protease and clostripain ≤1 unit/mg solid

shipped in

dry ice

storage temp.

−20°C

Application

用于消化胶原蛋白并从基质中释放贴壁细胞。
该产品适用于人类肿瘤、小鼠肾脏、人类成人和胎儿脑、肺和许多其他上皮组织的解聚。研究表明，它适用于肝脏和肾脏的灌注研究、胰腺消化、非实质大鼠肝细胞分离和肝细胞制备。胶原酶也用在糖基化终末产物的研究中制备动脉组织。经测试，该酶以约 1mg/mL 的浓度消化肝细胞。消化浓度范围为 0.1 至 5 mg/mL。

Biochem/physiol Actions

每摩尔胶原蛋白酶被4g原子钙活化。 它被乙二醇-双（β-氨基乙基醚）-N，NN′,N′-四乙酸，β-巯基乙醇、谷胱甘肽、巯基乙酸和8-羟基喹啉抑制。
胶原酶产物是 C. histolyticum分泌的酶混合物，可通过分泌酶中10-18个组分的相对比率来区分不同的产物。 其主要成分是两种胶原酶、梭菌蛋白酶、和一种中性蛋白酶。 这些酶的协同作用可降解胶原蛋白和其他细胞内物质。胶原酶和中性蛋白酶的作用对于从组织中有效释放细胞均是必需的。 各种类型的胶原蛋白都是胶原酶的天然底物。

Preparation Note

这种胶原酶是从 VII 型(C0773)溶组织性梭菌培养滤液中获得的。人们认为该培养滤液含有至少 7 种分子量为 68-130kDa 的不同蛋白酶。通常使用 TESCA 缓冲液（含有 50 mM TES，0.36 mM 氯化钙，pH 7.4，37℃）以 1-2 mg/mL 制备溶液。

Other Notes

一个胶原蛋白消化单元（CDU）从牛跟腱胶原蛋白中释放的肽链量和1.0 μ亮氨酸，5小时，pH7.4,37℃，在钙离子存在下的茚三酮颜色相同。一个 FALGPA水解单元每分钟，25℃，水解1.0 μmole 呋喃基丙烯酰-Leu-Gly-Pro-Ala。一个中性蛋白酶单元水解酪蛋白，产生颜色和1.0 μmole 酪氨酸每5小时，pH7.5,37℃下产生的相同。一个梭菌蛋白酶单元在DTT存在下，pH7.6,25℃，每分钟水解1.0 μmole BAEE。

Disclaimer

未开封的产品可在-20°C下稳定保存一年。在37℃、50℃和-20℃下储存30天，FALGPA或蛋白酶活性无损失。如果将粗制胶原酶溶液分装（10 mg/mL）后快速冷冻并冷藏在-20℃下，可稳定保存。后续的冻融循环将破坏溶液。若将本品放在冰上，可在7小时内保持100%活性。

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pictograms

Health hazardExclamation mark
GHS08,GHS07

signalword

Danger

Hazard Classifications

Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3

target_organs

Respiratory system

存储类别

11 - Combustible Solids

wgk

WGK 1

flash_point_f

Not applicable

flash_point_c

Not applicable

法规信息

常规特殊物品

此项目有

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实验方案

使用FALGPA（N-（3- [2-呋喃基]丙烯酰基）-Leu-Gly-Pro-Ala）进行的胶原酶酶法检测（EC 3.4.24.3）

在测定胶原酶活性时，使用N-（3-[2-呋喃基]丙烯酰基）-Leu-Gly-Pro-Ala在345nm处进行连续分光光度法测定。胶原酶水解胶原肽键。

Enzymatic Assay of Collagenase (EC 3.4.24.3) using FALGPA (N-(3-[2-Furyl]acryloyl)-Leu-Gly-Pro-Ala)

To measure collagenase activity, N-(3-[2-Furyl]acryloyl)-Leu-Gly-Pro-Ala is used in a continuous spectrophotometric rate determination at 345 nm. Collagenase hydrolyzes collagen peptide bonds.

商品

Collagenase Blends for Gentle Tissue Dissociation

Discover pre-mixed collagenase enzyme blends with DNase I, Dispase II, Elastase, and Hyaluronidase and gently dissociate animal tissues in vitro.