质粒DNA疫苗生产

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提高上游生产力并加快临床应用

pDNA存在多种可通过先进的一次性细胞收集和澄清技术加以克服的挑战。离心或微滤TFF（MF-TFF）可用于去除已使用的发酵液，而深层过滤器也在各种澄清条件下表现出了出色的性能。

通过稳健地去除杂质实现产量和效率目标

阴离子交换（AEX）已被证明可有效清除蛋白质、RNA、gDNA和内毒素。另一方面，通过离子交换分离质粒亚型相当有挑战性。在这种情况下，由于含有高盐的洗脱池，可使用HIC并将其置于AEX之后。

最大限度提高下游回收率

pDNA的纯化很复杂，需要结合使用TFF和色谱。TFF可置于澄清和层析步骤之间，其中残留的杂质会通过渗滤而被洗涤，pDNA会被浓缩用于层析。可使用树脂和膜用于层析纯化。树脂安装灵活且选择性佳，而膜则能提供高结合能力和流速。

确保患者安全

为确保患者安全，必须对纯化和配制的pDNA进行无菌过滤。虽然这一步看似简单，但pDNA的过滤可能较为棘手，因为存在质粒尺寸大、溶液粘度高和佐剂制剂的细菌保留问题。为了优化无菌级过滤，必须考虑多个工艺参数，包括盐浓度、质粒大小、纯度和质粒浓度。